Re: [實驗] 關於層析管柱相關問題
看到這麼有經驗的文章，受益良多
但想問一下，
HP-20樹脂，比起凝膠型樹脂
是大孔樹脂我明白，
但為何會另一個特性是離子交換型
這我就不懂了
查了網路定義
Ion exchange chromatography media contain negatively or positively charged funct
ional groups covalently bound to a solid support
這簡言之，好像就是固定相會有正負電荷基團吧？
但HP-20是一種聚乙烯和雙烯苯的共聚物
應該不會有電荷官能基團吧？
可是網路上在賣東西又有
ion exchange resin Diaion HP-20
這我又搞不懂了
我個人偏向他是疏水性樹脂啦，但徵求版友意見
※ 引述《shiaobau》之銘言
: ※ 引述《kinkilon (許我一個堂本剛吧!)》之銘言：
: : 最近在看paper...
: : 有看到幾種不同類型的層析管柱以及裡面填充的料...
: : 以下是我在PAPER上看到的東西:
: : 1. Cosmosil 75C18-OPN
: ^^^
: 沒用過,看型號是逆相層析用的填料
: 如果是的話,它是極性篩,依極性大小分離化合物
: 適用較高極性的化合物(polar)
: 印象中這類填充料都較貴,需重覆使用
: 注意移動相不要用低極性的,膠會部份溶出
: 所以跑的sample極性也不要太低,以最低移動相能溶為主
: : 2. silica gel 60 (70-230 mesh)
: 最常見的膠,便宜,好用
: 這個是中等mesh的,另有細的 230-400 粗的35-70等等
: 所謂mesh就是我們常說的目數
: 70-230就是最大70mesh,最小230mesh
: 會過70mesh的篩網,不會過230mesh的
: 粒徑大小介於這之間,其餘類推
: 這也是極性篩,適用中低極性化合物
: 移動相極性不可太高,會將膠體溶出
: 因較便宜,所以用一次就丟棄
: 常以n-hex 填柱,乾式上柱
: : 3. Diaion HP-20
: 這是日本三菱公司出品的
: 對岸常稱大孔樹脂,是離子交換型
: 常用方法為是使用適當的移動相讓sample通過
: 使部分化合物吸附在樹脂上
: 再用另種移動相將它洗下
: 通常可再生後再使用
: 記得報價大約每升1000-2000 NTD(有分裝過的價錢,原廠較便宜,但大包裝)
: : 4.Sephadex LH-20
: 常用的分子篩,但也能做極性篩使用
: 以分子篩為用的話,常只用一種移動相來跑
: 大分子會較快出來,小分子較慢
: 做極性篩則會改變移動相,逆相跑法
: 不能用太低極性的溶劑,膠會壞
: 一定是重覆使用,除非您待的實驗室非常有錢
: 記得一罐500g,以前買好像是5萬
: 以甲醇或二氯甲烷等填柱,濕式上柱
: : 我只知道其中3.是屬於離子交換~
: : 4.則是可依分子大小來純化樣品的東西~~那它是可以分離多大的分子量的呢??是1500嗎
?
: : 然後1.它是屬於何種特性的填充料??一樣是離子交換嗎??
: 分離多大分子量,印象中沒特別寫
: 但注意sample不要太髒,以前做天然物
: 都會先用si-gel通一次flash column
: 再用LH-20跑,不然一下去卡髒,前面一小段要棄去,會心痛..
: 印象中它是葡聚糖凝膠,原理是每一個球中間有很多小孔洞
: 大分子進不去小孔洞,會從旁邊流過,所以速度快
: 小分子會通過小孔洞,跑的路徑較大,速度較慢
: : 2.後面的(70-230 mesh)他是什麼用意啊??是網住介於70~230分子量大小的東西嗎??
: 如上所說,那是目數,與粒徑相關,
: 用越粗的,packing起來的管柱間隙越大
: 理論上全開流速較快,但分離效果較差
: 越細則相反,但也與packing技術有關
: : 因為我想要照著PAPER上所說的步驟下去做實驗...
: : 雖然說PAPER上寫的一定不完整....但是我還是想要搞懂它....
: : 因為之後我要找其他的替代品來代替上面這些東西.....所以想要知道他們的特性...
: : 我有請辜狗大師幫我的忙....可是找到的東西真的有限...@@"
: : 不知道有哪位大大可以幫我的忙~~~
: 這些東西,色層分析相關的課應該有吧.@@.
: 加修個實驗課,應該會有用到
: 貴的可能只會讓你們看一下,
: 像si-gel應該都會讓你們packing看看
: 附帶一提,取gel時最好都要戴口罩.
: 有些gel不會或不易被分解,吸多了會變矽肺病
: 一些淺見,如果有說錯再請其他大大指教
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